接種物的準備

? 根據(jù)"警告及注意"一欄所列方法打開一安瓿 API 懸浮培養(yǎng)基 (2mL)或使用 2mL 不含添加物的蒸餾水。

? 用棉簽收集已接好種的平板的培養(yǎng)物。

? 制得濁度大于 4 個麥氏標準單位的濃菌懸液。該菌懸液制備好后必須立即使用。

試條的接種

? 在試條的前一半( VP 至 ADH 測試)，用無菌吸管接種該菌懸液，避免產(chǎn)生氣泡(將試驗條向前稍傾斜，并將

吸管頂部靠至小管內(nèi)緣加液體)：

- VP 到 LAP 的試驗： 每管加入約 100 µL 菌懸液。

- 對于 ADH 試驗：只充滿管的部分

? 在試條的后一半 ( RIB 至 GLYG 測試)：

- 根據(jù)"警告及注意"一欄所列方法打開一安瓿 API GP 培養(yǎng)基并轉入剩下的菌懸液 (約 0.5mL) ，充分均勻。

- 這個新的菌懸液只接種到管的部分。

? 用礦物油覆蓋在帶下劃線的試驗(ADH 至 GLYG)的杯的部分，形成一個凸面。

? 蓋上蓋子。

? 36°C ± 2°C 培養(yǎng) 4- - 4 ?小時得到第一次結果，如需要，可在 24 小時(± 2 小時)讀取第二次結果。

試條判讀

經(jīng) 4 小時孵育后：

? 加入附加試劑：

- VP 試驗：各加 1 滴 VP 1 和 VP 2.。

- HIP 試驗： 加 2 滴 NIN。

- PYRA, ?GAL, ?GUR, ?GAL, PAL and LAP 試驗：各加 1 滴 ZYM A 和 ZYM B（*）。

*建議在使用前控制每個 ZYM B 安瓿。

為了消除任何缺陷試劑，建議按照質控章節(jié)所述應用 ATCC®

700400 菌株進行質量控制檢測。

? 等待 10 分鐘，參照讀表讀其反應結果。如需要，暴露試驗條于強光下（1000 W 燈泡 10 秒），使 PYRA 到 LAP

管內(nèi)多余試劑脫色。

如遇下屬情況須重新孵育：

- 分辨力很低。

- 數(shù)值圖譜難以接受或者可疑